
齧齒類動物血常規結果分析注意(yì)事項
血(xuè)液學檢查是動(dòng)物疾病狀態評估、術前檢查和常規體檢中必不可少的內容。評估血常規(guī)檢測報告(gào)的可靠性並解讀其(qí)結果是獸醫朋友們的工作日常(cháng)。本文就血液學檢查的一(yī)些要點進行(háng)分(fèn)析探討。
采血是進行血常規檢查的第一步,本公眾號(hào)曾經發表《獸醫隨筆:實驗動物采血指南》一文,介紹采血量和采血點的一般指導意見。
進行血液學分析(xī)時通常建(jiàn)議用EDTA抗凝管采集(jí)樣本,但采集時應該注意抗凝劑和血液的(de)比例。樣本質量會顯著影響檢測結果,常見的樣本質量問題有:
抗凝效果不(bú)佳導(dǎo)致(zhì)出現血凝塊,會使血小板(PLT),白細胞(WBC),紅細胞(RBC),紅細胞壓積(HCT)假性降低;
溶血會(huì)使RBC、HCT假性降低的同時平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、平均紅細胞血紅蛋白(MCH)假性升高;
乳糜血會(huì)使血(xuè)紅(hóng)蛋(dàn)白(bái)(Hb)、MCHC、MCH假性(xìng)升高;
樣本不新鮮會使紅細胞(bāo)形態發(fā)生(shēng)改變導致MCV和HCT假性升高,MCHC假性降低,同時白細胞(bāo)形態也會發生改變(biàn)。
紅細胞、白細胞和血小(xiǎo)板是血常(cháng)規報告(gào)中(zhōng)需(xū)要解讀的三個方麵(miàn)。
紅細胞
相比於人及其他哺乳類動物(wù),齧齒類(lèi)動物的紅細胞自有其特征。倉鼠的RBC約6.0微(wēi)米,豚鼠的約7.8微米。大鼠出生時紅細(xì)胞較大(10.03 μm),但在出生後(hòu)30天內變到小於6μm。小鼠RBC大小約4-7μm,隨年齡增長而增加(jiā)。多色性是齧齒類動物血象的一個(gè)常見特征。在豚鼠血塗片上還可見紅細胞疊連。特定疾(jí)病模型小鼠中(zhōng),如β地中海貧血模型小鼠RBC可觀察到異常形態,例(lì)如靶形紅(hóng)細胞、棘形狀紅細胞、淚滴狀紅細胞、破(pò)碎狀紅細胞、有核紅(hóng)細胞等。
(圖片來源:https://www.researchgate.net/publication/233535082)
和大多數哺乳動物(包括人(rén))不同的是,新生齧齒類動物(小鼠、大鼠、豚(tún)鼠、沙鼠)的血紅蛋白和血細胞比容值低(dī)於成年動物(wù);新(xīn)出生大鼠有16%的網織紅(hóng)細胞,成年後(hòu)則減少至2.5%;據報道,大鼠、沙鼠的RBC計(jì)數存在性別差(chà)異,雌(cí)性的計數通常(cháng)比雄性(xìng)高。不同品係的小鼠和大鼠,血紅蛋白值也會有很大的差(chà)異。
樣本采集部位(wèi)或(huò)麻醉的影(yǐng)響會導致血常(cháng)規數據的變化。例如,從(cóng)大鼠尾部采集的樣本中的血紅蛋白和紅細胞比容比從腹主動脈或心髒中(zhōng)采集的樣本中要高。豚鼠中已經證實RBC值可能由於麻醉期間發生脾(pí)內(nèi)紅細胞扣留而降低。
影(yǐng)響RBC參數的非致病性條件還包括妊娠、季節變化等。在大鼠中,紅細胞比容在妊娠期間減(jiǎn)少。在倉鼠中,RBC計數、血紅蛋白濃度和紅細(xì)胞比容在冬眠期間升高,這(zhè)是因(yīn)為在冬眠期間,倉鼠(shǔ)基礎代謝率降低,RBC壽命延長了。
紅細胞(bāo)和貧血
紅細胞(bāo)指標重點關注RBC、HCT和(hé)Hb,它們的變化可以提示動(dòng)物貧血或紅細胞增多。
齧齒類動物(wù)中(zhōng)並沒有原發性的紅細胞(bāo)增多症,但(dàn)可能見於輕度脫水的動物。貧血(xuè)則(zé)較為常見。初(chū)步判斷為貧血後,還需要關注平均紅細胞體積(MCV),MCH和MCHC,可用於輔助判(pàn)斷貧血類型,這(zhè)三項都偏低(dī)常見於缺鐵性貧(pín)血(xuè),而高於正常範圍多見於葉酸或維生素(sù)B12缺乏引起的貧血。網織紅細胞是尚未完全成熟的紅細胞,是反映骨髓造血功能的重要指標。當其升高時,提示骨髓造(zào)血功能旺盛,可能有溶(róng)血(xuè)性貧血、缺鐵性貧血等(děng);而當其(qí)降(jiàng)低時,可能有再生障礙性貧血、急性白血病等。
儀器分析的血常規化驗單(dān)隻能給出(chū)各種細胞的數量,但並不能給出細(xì)胞形態的異常描(miáo)述。因此為了更準確分析血液學檢查結果還建議對血樣塗片進行(háng)形態學檢查。
RBC形(xíng)態學可區分貧血的原因:出血、溶血、缺鐵、非再生性貧血、骨髓疾病或(huò)淋巴細胞增生性疾(jí)病(白血病)等(děng)。
如果診斷為溶血性貧血,則需要在血塗片中尋找血液寄生蟲的證(zhèng)據,如球狀附紅(hóng)細胞體和鼠血巴爾通體可(kě)能導(dǎo)致(zhì)小鼠或大鼠貧(pín)血。如果出現小紅細胞增多症、血色素減少、總蛋白低、血(xuè)小板增多和網(wǎng)織紅細(xì)胞計數升高則提示有慢性失血,建議檢查體表寄(jì)生蟲,在虱子嚴重感染的豚鼠和大鼠中可見這種現象。
白細胞
白細胞是(shì)機體抵禦感染、調控(kòng)炎症、免疫和造血的關(guān)鍵。
齧齒(chǐ)類動物的白細胞形態和其他哺乳(rǔ)動(dòng)物(wù)相似,但(dàn)又有一定區別,齧齒類(lèi)動物的粒細胞被(bèi)稱為嗜異性或假嗜酸性粒細胞,因為它含有紅色(sè)顆粒,與嗜酸性(xìng)粒細胞相似。豚鼠有獨特的Foa-Kurloff細胞(bāo)(一種T淋巴細(xì)胞),含(hán)有(yǒu)一個大的細胞質(zhì)包涵體。齧齒類動物的白細(xì)胞類型與(yǔ)其他哺乳動物相似(sì),但淋巴細胞數(shù)量遠超過粒細胞(bāo):淋巴(bā)細胞約占(zhàn)86%,中性粒細胞約占10% ~ 25%,單核細胞約占6%,嗜酸性粒細胞約占1% ~ 4%,嗜堿性粒細胞很少。
WBC計數每天都會發生(shēng)波動(dòng),因此采(cǎi)集樣本的位置和時間不(bú)同,結果(guǒ)也可能不同。中性(xìng)粒細胞計數隨著大鼠年(nián)齡的增長而增加,淋巴細胞計數隨著年齡的增長(zhǎng)而減少。
豚鼠的Kurloff 細胞
(圖片來源:https://en.wikipedia.org/wiki/Kurloff_cell)
白細胞:淋巴細胞
淋巴細胞(bāo)增多
淋巴細胞分為T淋巴細胞和B淋巴細胞(bāo),大多在外周淋巴組織中生成並在血液和淋巴組織中(zhōng)循(xún)環。淋巴細胞的增多大多為生理性的。反應性淋巴細胞增多的原因(yīn)包括注射疫苗後的短暫反(fǎn)應、長期免疫(yì)刺激、甲狀腺功能亢進(jìn)等;腎(shèn)上腺皮質功能減退也會導致淋巴(bā)細(xì)胞增多,並常伴隨(suí)低(dī)血糖、電解質異常,出現高鉀低鈉和高鈣血症;淋巴瘤、胸腺瘤(liú)可見淋巴細胞異常升高(gāo),淋巴細胞性白血病則在淋巴細胞異常(cháng)升高的同時伴有其他細胞係的減少。
淋巴細胞減少
淋巴細胞(bāo)減少最常見的原因是(shì)內外源性皮質類固醇激素增多,導致其(qí)從血液循環中轉移到(dào)淋巴組織中。在急性炎症反應、病毒感染以及發生內毒素血症和敗血症時,也可見淋(lín)巴細胞減少。免(miǎn)疫缺(quē)陷病(bìng)毒感染、免疫抑製(zhì)藥物的(de)使用也會讓淋巴細胞生成(chéng)減少。淋巴回流受(shòu)阻或丟失也會讓其計數減少。
(A)淋巴細胞,特征是有深紫色圓形核;(B)單核細胞(bāo),特征是有腎形細胞核;(C)中性粒細胞(bāo),特征為有紫色多小葉細胞核。
(圖片來源:Bjorner & Zhu, 2019)
白細胞:中性粒細(xì)胞
中性粒細胞增多
與其(qí)他哺乳動(dòng)物(wù)一樣,急性炎症反應的特征是中性粒細胞增多並有核左移。但並不是出現中(zhōng)性粒細胞增(zēng)多就意味著急性炎症反應(yīng),動物經曆劇烈運動、驚嚇傷心等強烈情緒後(hòu)也可出現生理性中性(xìng)粒細胞增多,但不會出現核(hé)左移。
應激或皮質類固醇也可導致動物出現中性粒細胞數量增加,無(wú)左移。
此外慢性粒細胞性白血病、中性粒細胞功能障礙也可使中性粒細胞數(shù)量增加,同時出現核左移、多組織髓外生成粒細胞、血小板減少等異常(cháng)。
正常情況下,外周血液(yè)中性(xìng)粒細胞以分(fèn)葉核為主,胞(bāo)核常(cháng)分為2~5葉,杆狀核較少。中(zhōng)性杆狀核粒細胞增(zēng)多或(和)出現晚幼粒(lì)細胞、中幼粒(lì)細胞,甚(shèn)至原(yuán)始/早幼粒細胞的現象,稱(chēng)為核左移。
中性(xìng)粒細胞減少
中性粒細胞減少也非常(cháng)常見,其中臨床常見的因素為嚴重的細菌感染(rǎn),例如肺炎、敗血(xuè)症(zhèng)、腹膜炎等,常會伴隨核(hé)左移和中毒性變(biàn)化。骨髓疾病、藥(yào)物毒性、病毒感染和腫(zhǒng)瘤等也可造成中(zhōng)性粒細胞減少,同時可能會(huì)伴有紅細胞(bāo)和血小板的減(jiǎn)少(shǎo)。
白細胞:嗜酸性(xìng)粒細胞
嗜酸性粒(lì)細胞主要聚集在皮膚、消化道和(hé)呼吸道(dào)黏膜等疏鬆結締組(zǔ)織中,它的增多常見(jiàn)於寄生蟲感染的動物和發生I型超敏反應(yīng)的動物。也由於其分布特點,大多血液寄生蟲不會引(yǐn)起嗜酸(suān)性(xìng)粒細胞(bāo)增(zēng)多。此(cǐ)外,還有一些臨床原因可導致嗜酸性粒細(xì)胞增多,比如(rú)嗜酸性粒細胞性腸炎、嗜酸性肌炎(yán)等炎(yán)症反應;某些能(néng)促進嗜酸性粒細胞生成(chéng)和釋放的腫(zhǒng)瘤(淋巴瘤、鱗狀(zhuàng)細胞癌等);腎上腺皮(pí)質機(jī)能減退等。
白細胞:嗜堿性粒細胞(bāo)
嗜堿性粒細胞參與遲(chí)發性過(guò)敏和寄生蟲免疫反應,因此嗜(shì)堿性粒細胞增多症常和嗜酸性粒細胞增多症同時發生。此(cǐ)外還可見於高脂血症(zhèng)、嗜堿性粒細胞性(xìng)白(bái)血病和骨髓增生性(xìng)疾病。
白細胞:單核細(xì)胞
單核細胞等主要功能是吞噬作用、調節炎症反(fǎn)應、參與抗原提呈、參(cān)與鐵的調節。因此(cǐ)當機(jī)體(tǐ)出現急性或慢性炎症、組織壞死時,都會導致單核細胞增多。中性粒細胞減(jiǎn)少時也(yě)會出現單核細(xì)胞(bāo)代償性增加。其他不常見的原因還包括應激或(huò)類固醇、單核細胞白血病等。齧齒(chǐ)類動物(wù)中,多達(dá)25%的F344大鼠會發生單(dān)核(hé)細胞性白血病。發病動物外周血中,可見非典型性單核細胞,白細胞(bāo)計數極度增(zēng)高和溶血性貧血。
血小板
血小板為骨髓巨核細胞胞(bāo)漿裂解脫落的小塊胞(bāo)質,其(qí)主要作(zuò)用是凝血和止血,修補破損血管。齧齒類動物的(de)血小板數量和(hé)凝血過程與(yǔ)其他哺乳動物相似。在小鼠、大鼠或豚鼠中,未觀察到血小板計數的性別或品係差異。大鼠的血小板會聚集,計數往往不可靠。
血(xuè)小板減少
血小板減少症發(fā)生時(shí),動物可出現瘀斑、瘀點、黏(nián)膜出血、止血困難等。但血液分析儀判讀為血小板減少時,應做血(xuè)塗片確認是否發生凝集,因為血小(xiǎo)板做血液采集、運輸、儲存過程中會活化並凝集(jí)進(jìn)而影響機器讀取數(shù)據。通過無創性靜脈穿刺采血、使用檸(níng)檬酸鹽抗(kàng)凝劑、減(jiǎn)少采樣後儲(chǔ)存時間、避免低溫等措施可以減少這(zhè)種影響。
通常血小板減少是一過性的,跟多種係統性疾病都有關聯,隨著疾病的康複,血(xuè)小板計數也會恢複正常。持續性的或進行性(xìng)的血小板(bǎn)減少症表明血小板生成或消(xiāo)耗持續失衡。例如血小板減(jiǎn)少伴隨(suí)白細胞減(jiǎn)少和(或)貧血通常提示骨髓疾病引起的造血功能障(zhàng)礙;免疫介導的破壞等。
血小板增多
血小板計(jì)數增多可能由原發性血小板(bǎn)增多症、骨髓(suǐ)增殖性疾病和繼發性血小板增多症引起。